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腺病毒AdMax和AdEasy系统的区别,如何选择病毒包装系统?

2024.07.05 浏览量 来源:汉恒生物

腺病毒除了用作基因治疗药物载体和疫苗载体以外,在基础生物医学研究上也受到科研工作者的青睐,可以搭载最高达8kb大小的目的基因。动物实验和细胞实验均适用,尤其对于一些比较难感染上的原代细胞或悬浮细胞都有着较好的感染能力。腺病毒基因组不会整合到宿主细胞中,可以直接进行翻译和转录,相比于RNA病毒起效更快。

腺病毒AdMax和AdEasy系统的区别,如何选择病毒包装系统

目前,腺病毒载体的包装系统主要有两种:AdMax系统和AdEasy系统。这两种包装系统都是二质粒系统,即需要一个骨架质粒和一个携带外源基因的穿梭质粒;都需要能够表达E1基因的293A细胞作为包装细胞,另外293A细胞为单层细胞有利于空斑的形成和观察。AdMax和AdEasy的主要区别在于病毒基因组重组的过程不同:

AdMax系统:病毒基因组重组过程简单,骨架质粒和穿梭质粒直接转染至293A细胞中重组即可。

AdMax系统腺病毒质粒基因组重组示意图

图1 AdMax系统腺病毒质粒基因组重组示意图

AdEasy系统:该系统是在细菌中进行的。首先骨架质粒整合到BJ5183感受态细胞中,再将穿梭质粒线性化后转化到BJ5183,二者则在BJ5193中重组,验证重组效果后,转至Stbl3感受态细胞大量制备重组质粒,再线性化后,即可转入包装细胞进行包毒。

Adeasy系统腺病毒质粒基因组重组示意图

图2 Adeasy系统腺病毒质粒基因组重组示意图

可见,AdMax包装系统操作简便、包装周期短,且出毒率高,但会存在重组假阳性的风险。而AdEasy的包装过程较为复杂,周期长,但其包装成功率高,假阳性低。汉恒主要使用的是AdEasy包装系统,大家可以根据自己的实验需求针对性选择,两种系统的具体特点比较见表1:

表1 腺病毒两种包装系统的对比

腺病毒两种包装系统的对比

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