血清怎么选？细胞实验大pk有图有真相

血清——每一个“细胞培养专业户”都不会陌生的东西。血清种类繁多，鱼龙混杂，很多同学，特别是刚接触细胞培养的，一时之间会难以分辨血清质量的优劣。

小恒在科研前线挣扎多年，有必要分享一些辨别血清的经验，希望同学们都能擦亮眼睛选购哦！

一、外观

颜色：根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清，质量最好的呈现出谈黄、微红色。

沉淀：血清中的沉淀一般是由纤维蛋白凝聚产生，对血清质量没有影响，购买回来的血清的融化，最好在温度较低的状态下慢慢进行，否则沉淀相对较多，虽然沉淀并不直接影响血清的质量，但对细胞的显微观察有一定的阻碍。

澄清度：进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低，表现为稀薄、清淡，而国产血清，因为绝大多数是新生牛血清，相对而言更加粘稠，颜色略深。

二、主要技术指标

1、内毒素标准为不高于5EU/ml

内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分，内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。

2、总蛋白含量：胎牛血清一般范围是30-40mg/ml

3、血红蛋白标准为不高于20mg/dl

4、pH，国产血清、大多高于7.5，进口胎牛血清，大多低于7.5，具体原因未知，可能和牛龄有关，这也能用来初步鉴别血清的来源。

5、微生物：包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制，支原体大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染则比较严重，很难彻底清除，但对血清质量影响不大。病原性病毒，特别是BVDV，在国产血清中几乎90%以上都存在，这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一，而进口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白，免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况，国产血清，基本都是新生牛的，血清中容易产生IgM，IgG的含量也偏高，进口胎牛血清不含IgM，IgG的含量也较低。

7、不管是国产还是进口血清，都是不测抗生素的（无四环素胎牛血清除外）。国外抗生素的使用很严格，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低；国内血清中抗生素残留较高，对细胞培养不利。

现在如何辨别血清的优劣已经不在话下。那么不同血清在实验过程中的具体效果究竟如何呢？

以汉恒特级胎牛血清为例，从细胞培养和病毒包装两个方面进行了详细检测。

病毒感染

实验选用不同血清包装的病毒感染同种细胞后，观察到的荧光图，以此来判断血清对病毒包装的影响。

1. LV-ZsGreen-puro

（血清1为汉恒血清、血清2-10为其他品牌血清，血清11为汉恒血清不同批次对照）

2. LV-eRFP-LC3

（血清1为汉恒血清、血清2-10为其他品牌血清，血清11为汉恒血清不同批次对照）

3. AAV-EGFP

（血清1为汉恒血清、血清2-10为其他品牌血清，血清11为汉恒血清不同批次对照）

4. AAV-luc-ZsGreen

（血清1为汉恒血清、血清2-10为其他品牌血清，血清11为汉恒血清不同批次对照）

上图均为40倍放大效果

细胞培养活力测试

1. 293T细胞

（血清A为汉恒血清、血清B、C为其他品牌血清）

2. MDA-MB-231细胞 第一代

（血清1为汉恒血清、血清2-13为其他品牌血清）

3. MDA-MB-231细胞 第二代

（血清1为汉恒血清、血清2-13为其他品牌血清）

4. Raw 264.7细胞 第一代

（血清1为汉恒血清、血清2-13为其他品牌血清）

5. Raw 264.7细胞 第二代

（血清1为汉恒血清、血清2-13为其他品牌血清）

上图均为100倍放大效果

MDA-MB-231和Raw 264.7属于敏感度高，较难培养的细胞

在细胞形态上：

MDA-MB-231细胞在13种血清下形态皆变化不大。Raw 264.7细胞在11号血清中分化较严重，其余血清下形态皆变化不大。

在细胞增殖上：

MDA-MB-231细胞：4号、5号、9号、10号血清死细胞多，增殖速度慢。1号（汉恒血清）、2号、3号、6号、7号血清增殖速度比较稳定，细胞状态较好。

Raw264.7细胞：1号（汉恒血清）、2号、8号血清细胞增殖速度快，细胞状态较好。

综合评价：

① 4号、5号血清对细胞状态影响大，增殖慢

② 1号（汉恒血清）、6号、7号、8号表现较稳定，建系后背景良好，状态良好，增殖正常。

总结

实验结果表明，使用不同的血清包装病毒，进行细胞感染，汉恒胎牛血清表现优异；在细胞培养活力测试中，无论从细胞形态上还是从细胞增殖情况上，汉恒血清培养的这两个稳定株细胞都表型优异，状态和增殖情况均稳定良好。

汉恒特级胎牛血清已经过各项质量检测，选自优质胎牛，全程保持严格质控，具有超高稳定性。现有尝鲜价活动和超值优惠正装，感兴趣的同学可以扫码申请哦！